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PCR儀利用升溫使DNA變性,用限制性內(nèi)切酶使DNA雙鏈解鏈,在聚合酶的作用下使單鏈復(fù)制成雙鏈,進(jìn)而達(dá)到基因復(fù)制的目的。PCR儀可以分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀等幾類。普通PCR儀一般把一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度的PCR儀,稱之為普通PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運(yùn)行。主要是用作簡(jiǎn)單的,對(duì)目的基因退火溫度的擴(kuò)增。它主要應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)、檢疫等。
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PCR儀是什么呢?它是聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù),指利用耐熱DNA聚合酶的反復(fù)作用,通過(guò)變形-延伸-復(fù)性的尋壞操作,在體外迅速將DNA模板擴(kuò)增數(shù)百萬(wàn)倍的一種操作技術(shù)。PCR就是利用DNA聚合酶對(duì)特定基因做體外或試管內(nèi)InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。目前常用的技術(shù),可以將一段基因復(fù)制為原來(lái)的一百億至一千億倍。根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn),可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀四類。這就是PCR儀。
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酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺(tái)變相的光電比色計(jì)或分光光度計(jì)。酶標(biāo)儀是采用手工移動(dòng)微孔板進(jìn)行檢測(cè),因此省去了X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡(jiǎn)單.微孔板是一種經(jīng)事先包理于放置待測(cè)樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個(gè)小孔可盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液.其常見(jiàn)規(guī)格有24孔板,48孔板,96孔板等多種,不同的儀器選用不同規(guī)格的孔板,對(duì)其可進(jìn)行一孔一孔地檢測(cè)或一排一排地檢測(cè)。這就是酶標(biāo)儀的構(gòu)成。
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酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,它也有很多種的分類,其中有種全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀。全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀具備微孔板和比色杯測(cè)量的雙重功能,既可作為全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀,也可作為全波長(zhǎng)分光光度計(jì)使用。比色杯類型包括標(biāo)準(zhǔn)比色杯、微量、超微量比色杯,以及TrayCell。波長(zhǎng)范圍從200nm到1000nm,包括紫外和近紅外,可以自由選擇任何波長(zhǎng)。主要運(yùn)用于可低紫外區(qū)的檢測(cè)。全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀和普通酶標(biāo)儀的結(jié)構(gòu)功能相似。
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酶標(biāo)儀按照功能的不同劃分,可以分為光吸收酶標(biāo)儀,可見(jiàn)酶標(biāo)儀,紫外/可見(jiàn)酶標(biāo)儀。熒光酶標(biāo)儀?;瘜W(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀使用的是塑料微孔板。酶標(biāo)板常用透明的聚乙烯材料制成,對(duì)抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用,因此用它作為固相載體,酶標(biāo)板通常為48孔或96孔,每個(gè)微孔可以盛裝不同的溶液。它的光路方向是垂直光路,由于酶標(biāo)板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過(guò),因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過(guò)待測(cè)溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過(guò)比色液。而且光路的長(zhǎng)度應(yīng)該是液體液面的...
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酶標(biāo)儀使用范圍主要有:酶活性、吞噬作用、鈣通量、細(xì)胞活力、凋亡、免疫化驗(yàn)、蛋白質(zhì)和DNA濃度等測(cè)量。它是一個(gè)具有熒光發(fā)光測(cè)量時(shí)極低噪音的通用型探測(cè)器,是一種新型的酶標(biāo)儀。它具有對(duì)熒光共振能量轉(zhuǎn)移和生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移的能力,擁有更強(qiáng)的熒光檢測(cè)極限。操作時(shí),要注意操作說(shuō)明,以防對(duì)操作人員造成損害。如果儀器接觸過(guò)污染性或傳染性物品,請(qǐng)進(jìn)行清洗和消毒。不要在測(cè)量過(guò)程中關(guān)閉電源。對(duì)于因試劑盒問(wèn)題造成的測(cè)量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參數(shù),以達(dá)到*效果。zui后,使用后蓋好防塵罩...
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酶標(biāo)儀的分類方法眾多,但zui簡(jiǎn)單的莫過(guò)于用他們的濾光方式來(lái)作分界線。一般來(lái)說(shuō)可以分為濾光片型和光柵型兩大類。一臺(tái)機(jī)器里面同時(shí)裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測(cè),還是想用光柵的時(shí)候,用光柵,該用濾片的時(shí)候用濾片;還有一些實(shí)驗(yàn)非用其中一個(gè)不可,另一模塊實(shí)現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,并沒(méi)有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。所以,濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,配合二向色鏡等光路系統(tǒng),可以實(shí)現(xiàn)大部分實(shí)驗(yàn)的需要。
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