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II型膠原蛋白（Col II）ELISA 試劑盒

需要而未提供的試劑和器材

1.   37℃恒溫箱。

2.   標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

3.   精密移液器及一次性吸頭

4.   蒸餾水，

5.   一次性試管

6.   吸水紙

II型膠原蛋白（Col II）ELISA 試劑盒

競(jìng)爭(zhēng)法

1. 競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制，一般用于檢測(cè)小分子抗原，其操作步驟為：

2. 將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤(pán)上，完成后洗去多余抗體

3. 加入待測(cè)檢體，使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)

4. 加入帶有酶的抗原，此抗原也可與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)，由于塑膠孔盤(pán)上固著的抗體數(shù)量有限，因此當(dāng)檢體中抗原的量越多，則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少，亦即，兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤(pán)上抗體鍵結(jié)，即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來(lái)。

5. 洗去檢體與帶有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，當(dāng)檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤(pán)內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少，顯色也就越淺。

   當(dāng)需要偵測(cè)無(wú)法獲得兩種以上單一性抗體的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤(pán)上時(shí)，一般會(huì)考慮使用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA。